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微生物接種主要方法

發(fā)表時間:2016-10-31

斜面接種法
此法主要用于移種純菌,使其增殖后用于鑒定或保存菌種。通常是從平板培養(yǎng)物上挑取某一單獨(dú)菌落或者從一支已長好的斜面菌種,移種至斜面培養(yǎng)基上,接種步驟如下:
(一)左手拿兩支試管,一支為經(jīng)滅菌的斜面,另一支為已長好的菌種。右手持接種環(huán)或接種針通過火焰滅菌后冷卻,并同時以右手小指和無名指輕輕拔取兩支試管的棉塞或試管帽(先轉(zhuǎn)動棉塞后拔去),夾持于手指間。
(二)將試管口通過火焰數(shù)次,并稍轉(zhuǎn)動,以防止外界的污染。
(三)首先將接種環(huán)伸入有菌試管,使接種環(huán)接觸菌苔取少量菌,取出接種環(huán),立即將管口通過火焰滅菌后將接種環(huán)伸入斜面管內(nèi),先從斜面底部到頂端拖一條接種線,再自下而上的蜿蜒涂布,或直接自斜面底部向上蜿蜒涂布。此步注意接種環(huán)不可碰試管壁和接種時不要劃破培養(yǎng)基。
(四)燒試管口,塞好棉塞或蓋好試管帽,將接種環(huán)插到酒精瓶中。
平板劃線接種法(分離培養(yǎng)法)
是將細(xì)菌分離培養(yǎng)的常用技術(shù),其目的是將混有多種細(xì)菌的培養(yǎng)物,或標(biāo)本中不同的細(xì)菌使其分散生長,形成單個菌落或分離出單一菌株,便于識別鑒定。平板劃線接種方法較多,其中以分段劃線法與曲線劃線法較為常用。 
(一)分段劃線法:本法多用于含菌量較多的標(biāo)本。方法是以接種環(huán)沾取少許樣品先涂布于平板培養(yǎng)基表面一角作為第一段劃線(劃線時接種環(huán)與培養(yǎng)基表面呈45度角),然后將接種環(huán)置火焰上滅菌,冷卻(可接觸平板試之,如不融化瓊脂,即已冷卻),于第二段處再作劃線,且在開始劃線時與第一段的劃線相交接數(shù)次,以后劃線不必再相接,待第二段劃完時,再如上法滅菌,接種劃線,依次劃至最后一段,滅菌接種環(huán)。這樣每一段劃線內(nèi)的細(xì)菌數(shù)逐漸減少,即以獲得單個菌落,劃線接種完畢,蓋好平皿蓋,倒置(平板底部向上)于37℃溫箱中培養(yǎng)。
(二)連續(xù)劃線法:此法多用于接種材料中含菌數(shù)量不太多的樣品或培養(yǎng)物。方法是先將樣品或培養(yǎng)物涂于平板表面的一角,然后用接種環(huán)自樣品涂擦處開始,向左右兩側(cè)劃開并逐漸向下移動,連續(xù)劃成若干條分散的平等線。
液體接種法
此法多用于單糖發(fā)酵試驗(yàn)等,接種方法與斜面接種方法基本相同。以左手持培養(yǎng)基與菌種管,右手持接種環(huán)和拔持棉塞,將挑取的菌落或菌液接種于液體培養(yǎng)基內(nèi)。

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