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上海滬崢生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
牛病毒性腹瀉病毒2型PCR檢測(cè)試劑盒
  • 品牌:上海滬崢
  • 產(chǎn)地:國(guó)內(nèi)
  • 貨號(hào):HZT2345
  • 價(jià)格: ¥2800/千克
  • 發(fā)布日期: 2021-03-16
  • 更新日期: 2025-06-06
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 國(guó)內(nèi)
品牌 上海滬崢
貨號(hào) HZT2345
用途 僅科研
包裝規(guī)格 50T/盒
純度 詳詢客服%
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口






產(chǎn)品特點(diǎn):1、靈敏度高,抗污染能力強(qiáng),定量準(zhǔn)確,重復(fù)性好;2、樣本處理與PCR擴(kuò)增在同一個(gè)PCR反應(yīng)管中即可完成;3、無(wú)需加熱

產(chǎn)品說(shuō)明:1.高便捷性。 2.靈敏度高。 3.特異性強(qiáng)。 4.精密性好。 5.結(jié)果準(zhǔn)確可靠。 6.嚴(yán)格的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

結(jié)構(gòu)及組成:聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)液(PCR反應(yīng)液)、RNA提取液、DEPC水、內(nèi)標(biāo)模板、陰性質(zhì)控品、陽(yáng)性質(zhì)控品。(具體內(nèi)容詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū))


試劑盒準(zhǔn)備物品:
清理液(A)                                    毫升
染色液(t B)                                  微升
稀釋液(C)                                    毫升
溶解液(tD)                                   毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)                                       1份
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

P CR實(shí)驗(yàn)概述

 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction, PCR)自誕生之日起就決定了它不僅是一種高敏感、高特異的檢測(cè)核酸分子的定性方法,而且也是一個(gè)能對(duì)核酸分子進(jìn)行定量的有力工具。隨著分子生物學(xué)技術(shù)研究的不斷進(jìn)展,定量PCR技術(shù)取得了突飛猛進(jìn)的發(fā)展,實(shí)時(shí)定量PCR (real-timequantitative PCR)技術(shù)便是一種具有意義的定量PCR技術(shù)。所謂實(shí)時(shí)定量PCR是指在PCR指數(shù)擴(kuò)增期間通過(guò)連續(xù)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)強(qiáng)弱的變化來(lái)即時(shí)測(cè)定特異性產(chǎn)物的量,并據(jù)此推斷目的基因的初始量。

PCR實(shí)驗(yàn)原理介紹

TaqMan熒光探針

PCR擴(kuò)增時(shí)在加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收;PCR擴(kuò)增時(shí),Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào),即每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物形成同步。

牛病毒性腹瀉病毒2型PCR檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):

1.基礎(chǔ)程序。
2.?dāng)U增溫度和延伸溫度。
3.反應(yīng)時(shí)間。
4.循環(huán)次數(shù)。
5.PCR 反應(yīng)液的配制。
6.PCR技術(shù)的基本原理。
7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)。
8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物。
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。






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