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產(chǎn)地 | 國產(chǎn),進(jìn)口 |
保存條件 | |
品牌 | 滬崢生物 |
貨號(hào) | HZX-50221 |
用途 | 僅用科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | |
保質(zhì)期 | |
器官來源 | |
免疫類型 | |
品系 | |
生長狀態(tài) | 貼壁 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | 25T |
是否進(jìn)口 |
原代凍存或復(fù)蘇培養(yǎng),復(fù)蘇時(shí)間1-2周,保證細(xì)胞純度在98%以上,同時(shí)也需經(jīng)過微生物檢測,保證不含有HIV、HBV、HCV、支原體、真菌及其他類型的細(xì)菌.
細(xì)胞名稱 :人胚腎細(xì)胞
簡稱: AAV-293
組織來源:腎;以腺病毒5 DNA 進(jìn)行轉(zhuǎn)化
培養(yǎng)條件:DMEM(高糖)+10% FBS+1% P/S
形 態(tài):貼壁;上皮細(xì)胞樣
背 景:我們推薦使用AAV-293細(xì)胞株繁殖腺病毒相關(guān)重組病毒。AAV-293源自普遍使用的 HEK293細(xì)胞株,但產(chǎn)生的病毒滴度更高。跟HEK293細(xì)胞一樣,AAV-293細(xì)胞反式表達(dá)腺病毒E1基因,當(dāng)共轉(zhuǎn)染三個(gè)AAV助質(zhì)粒(一個(gè)含ITR的質(zhì)粒,pAAV-RC和E1缺失助質(zhì)粒)時(shí),可以產(chǎn)生有感染力的腺病毒-相關(guān)病毒顆粒。
細(xì)胞數(shù): 1×106cells
規(guī)格: 1ml/T25
運(yùn)輸保存:采用干冰保存運(yùn)輸
細(xì)胞用途:僅供科研使用
人胚腎細(xì)胞,AAV-293培養(yǎng)操作規(guī)程僅供參考
準(zhǔn)備好培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件及凍存液。
細(xì)胞處理
復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。 天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)
細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),先要消化處理并進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。消化方法按照細(xì)胞傳代方法的1-3步驟進(jìn)行,*的重懸液使用血清。懸浮細(xì)胞直接計(jì)數(shù)后離心,用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。
人胚腎細(xì)胞,AAV-293購買細(xì)胞注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺(tái)盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時(shí)和我們聯(lián)系,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件.
6. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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